Η διασφάλιση της ασφάλειας των φαρμάκων αποτελεί κεντρική απαίτηση για την ανάπτυξη καινοτόμων φαρμάκων και η ανοσοτοξικότητα έχει γίνει ολοένα και πιο σημαντική εστίαση τόσο για τους ρυθμιστές όσο και για τους προγραμματιστές. Η ανοσοτοξικότητα αναφέρεται σε ακούσιες επιδράσεις του φαρμάκου στο ανοσοποιητικό σύστημα, οι οποίες μπορεί να οδηγήσουν σε ανοσοκαταστολή, ανώμαλη ενεργοποίηση του ανοσοποιητικού, υπερευαισθησία, απελευθέρωση κυτοκίνης ή αναπτυξιακά ανοσολογικά αποτελέσματα. Η μη κλινική αξιολόγηση ανοσοτοξικότητας θα πρέπει να ακολουθεί μια στρατηγική-με βάση τον κίνδυνο-κατά περίπτωση-, χρησιμοποιώντας μια προσέγγιση Βάρος Απόδειξης (WoE). Αυτό σημαίνει ενσωμάτωση ιδιοτήτων που σχετίζονται με το φάρμακο, μηχανισμός δράσης, έκφραση στόχου σε ανοσοποιητικούς ιστούς, υπάρχοντα δεδομένα από παρόμοια προϊόντα, in vitro ή ex vivo ευρήματα, αποτελέσματα ρουτίνας τοξικολογίας, ADME και πληροφορίες έκθεσης, κλινικό πλαίσιο, πληθυσμός ασθενών, δοσολογικό σχήμα και τυχόν πρώιμα κλινικά ανοσολογικά{{7} σήματα. Κεντρικές μελέτες ασφάλειας που προορίζονται να υποστηρίξουν ρυθμιστικές υποβολές θα πρέπει να διεξάγονται υπό συνθήκες ΟΕΠ για να διασφαλιστεί η αξιοπιστία και η ιχνηλασιμότητα των δεδομένων.
Ένας βασικός τομέας αξιολόγησης ανοσοτοξικότητας είναι η ανοσοκαταστολή, η οποία συμβαίνει όταν ένα φάρμακο μειώνει τη λειτουργία του ανοσοποιητικού ή παρεμβαίνει στην ανοσολογική επιτήρηση. Αυτό μπορεί να προκύψει από άμεσες επιδράσεις στα ανοσοκύτταρα, αναστολή κρίσιμων οδών σηματοδότησης όπως TCR, BCR ή σηματοδότηση κυτοκίνης ή έμμεσες επιδράσεις σε ανοσορυθμιστικούς μηχανισμούς. Οι συνήθεις τοξικολογικές μελέτες μπορούν να παρέχουν πρώιμα προειδοποιητικά σήματα, συμπεριλαμβανομένων αλλαγών στον θύμο αδένα, τη σπλήνα, τους λεμφαδένες, τον μυελό των οστών, την ιστοπαθολογία του ανοσοποιητικού οργάνου, τον αριθμό των λεμφοκυττάρων, τις διαφορές λευκοκυττάρων και τα επίπεδα σφαιρίνης ορού. Όταν αυτά τα ευρήματα υποδηλώνουν πιθανή ανοσοκαταστολή, μπορεί να χρειαστούν πρόσθετες λειτουργικές δοκιμασίες, όπως απόκριση εξαρτώμενης από Τ{3}κύτταρο-αντισώματος (TDAR), δοκιμασίες δραστηριότητας φυσικών κυττάρων φονέων, δοκιμές φαγοκυττάρωσης μακροφάγων και ανάλυση υποομάδων λεμφοκυττάρων με κυτταρομετρία ροής. Η σοβαρή ή ευρεία ανοσοκαταστολή μπορεί επίσης να βλάψει την ανοσολογική επιτήρηση του όγκου, επομένως ο κίνδυνος καρκινογένεσης θα πρέπει να αξιολογηθεί χρησιμοποιώντας μια προσέγγιση βασισμένη στο WoE.
Μια άλλη σημαντική ανησυχία είναι η ανοσοενίσχυση ή η ανοσολογική ενεργοποίηση, στην οποία ένα φάρμακο αυξάνει ασυνήθιστα τις ανοσολογικές αποκρίσεις του ξενιστή. Αυτό μπορεί να συμβεί μέσω της άμεσης διέγερσης της οδού του ανοσοποιητικού, της αναστολής της αρνητικής ανοσολογικής ρύθμισης ή μηχανισμών που μιμούνται τα ενδογενή ανοσοδιεγερτικά σήματα. Η υπερβολική ενεργοποίηση του ανοσοποιητικού μπορεί να διαταράξει την ανοσολογική ανοχή και δυνητικά να προκαλέσει ή να επιδεινώσει την αυτοάνοση νόσο. Για τα βιολογικά φάρμακα, τις κυτταρικές θεραπείες και άλλα προϊόντα που αναμένεται να ενεργοποιήσουν τις ανοσολογικές αποκρίσεις, το σύνδρομο απελευθέρωσης κυτοκίνης είναι ένας κρίσιμος κίνδυνος. Αναλύσεις απελευθέρωσης κυτοκίνης in vitro χρησιμοποιώντας μονοπύρηνα κύτταρα ανθρώπινου περιφερικού αίματος ή ολικό αίμα χρησιμοποιούνται συχνά για την αξιολόγηση κυτοκινών όπως IL-6, TNF- και IFN- σε σχετικές συγκεντρώσεις φαρμάκου. Σε προϊόντα υψηλού Η υπερευαισθησία και οι ψευδοαλλεργικές αντιδράσεις θα πρέπει επίσης να λαμβάνονται υπόψη με βάση τη δομή του φαρμάκου, τον μηχανισμό δράσης και τις παρατηρήσεις των ζώων.
Η αναπτυξιακή ανοσοτοξικότητα θα πρέπει να αξιολογείται όταν ένα φάρμακο έχει πιθανές ανοσοτοξικές επιδράσεις και μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε έγκυες ή θηλάζουσες γυναίκες, παιδιά ή καταστάσεις όπου αναμένεται έκθεση των απογόνων. Αυτές οι αξιολογήσεις μπορεί να ενσωματωθούν σε βελτιωμένες μελέτες προ{1}} και μεταγεννητικής ανάπτυξης ή να διεξαχθούν ως αποκλειστικές μελέτες αναπτυξιακής ανοσοτοξικότητας. Τα βασικά καταληκτικά σημεία μπορεί να περιλαμβάνουν την ανάπτυξη του ανοσοποιητικού οργάνου, τους πληθυσμούς ανοσοκυττάρων και τις ανοσολογικές αποκρίσεις σε τυπικά αντιγόνα στους απογόνους. Ευρύτερα, η επιλογή των μεθόδων ανοσοτοξικότητας και των ζωικών μοντέλων θα πρέπει να καθοδηγείται από την ανάλυση WoE, τα χαρακτηριστικά του φαρμάκου και τα συγκεκριμένα ερωτήματα του ανοσοποιητικού που αντιμετωπίζονται. Οι τυπικές τοξικολογικές μελέτες παρέχουν τη βάση, ενώ συμπληρωματικές αναλύσεις όπως το TDAR, η δραστηριότητα των κυττάρων ΝΚ, η κυτταρομετρία ροής και οι δοκιμές απελευθέρωσης κυτοκίνης επιτρέπουν βαθύτερη αξιολόγηση συγκεκριμένων ανοσολογικών κινδύνων.
Η επιλογή του ζωικού μοντέλου είναι ιδιαίτερα σημαντική για την αξιολόγηση της ανοσοτοξικότητας. Τα επιλεγμένα είδη θα πρέπει να έχουν σχετική έκφραση στόχο, φαρμακολογική απόκριση και μεταβολικά χαρακτηριστικά συγκρίσιμα με τον άνθρωπο. Τα τρωκτικά χρησιμοποιούνται συνήθως για τυπικές τοξικολογικές μελέτες και προσδιορισμούς όπως το TDAR, αλλά μπορεί να μην είναι πάντα κατάλληλα για σύνθετα βιολογικά φάρμακα, φάρμακα αντισωμάτων, πρωτεΐνες σύντηξης, γονιδιακές θεραπείες ή κυτταρικές θεραπείες λόγω διαφορών της ειδικής βιολογίας του είδους- και της ανοσοαπόκρισης. Σε αυτές τις περιπτώσεις, μη-ανθρώπινα πρωτεύοντα ή άλλα μεγάλα ζωικά μοντέλα μπορεί να παρέχουν περισσότερες προγνωστικές πληροφορίες, ιδιαίτερα για σύνθετες ανοσοτροποποιητικές επιδράσεις, κίνδυνο απελευθέρωσης κυτοκίνης και ανοσογονικότητα. Συνολικά, η μη κλινική αξιολόγηση ανοσοτοξικότητας θα πρέπει να διεξάγεται σε φάσεις, από τον πρώιμο in vitro έλεγχο και την προκαταρκτική τοξικολογία κατά την ανακάλυψη, μέχρι τις συνήθεις και συμπληρωματικές μελέτες πριν από την υποβολή του IND και έως τις πιο εκτενείς αξιολογήσεις, όπως μελέτες αναπτυξιακής ανοσοτοξικότητας ή καρκινογένεσης κατά τη μεταγενέστερη ανάπτυξη, όταν δικαιολογούνται από αναδυόμενους κινδύνους.
