Η ανάλυση του εγκεφαλονωτιαίου υγρού (ΕΝΥ) είναι ένα ισχυρό εργαλείο για την ενίσχυση της ανίχνευσης διαφόρων διεργασιών που συμβαίνουν στο κεντρικό νευρικό σύστημα, όπως αιμορραγία, φλεγμονή, λοίμωξη, όγκοι και άλλες κλινικές καταστάσεις. Επιπλέον, οι σειριακές αξιολογήσεις ενώσεων στο ΕΝΥ (όπως ορμόνες, φάρμακα, νευροδιαβιβαστές, βιοδείκτες, μεταβολίτες και ιοί) είναι εξίσου κρίσιμες τόσο στη βασική όσο και στη μεταφραστική έρευνα. Ο όγκος του ΕΝΥ στο κεντρικό νευρικό σύστημα διατηρείται σταθερός μέσω της έκκρισης και της απορρόφησης.
Ι. Λειτουργικά Θέματα
Το ΕΝΥ συνήθως συλλέγεται είτε μέσω εγκεφαλικής κοιλίας είτε μέσω οσφυϊκής παρακέντησης. Η οσφυονωτιαία παρακέντηση ενέχει σχετικά χαμηλότερο κίνδυνο επιπλοκών σε πρωτεύοντα μη-ανθρώπινα, επειδή, στα περισσότερα είδη, το σημείο της οσφυϊκής παρακέντησης απέχει από το άκρο του νωτιαίου μυελού. Η κατάλληλη αναισθησία και οι άσηπτες τεχνικές, συμπεριλαμβανομένης της προετοιμασίας του σημείου, όπως το ξύρισμα και η χρήση αποστειρωμένων υλικών, είναι απαραίτητες. Θα πρέπει να χρησιμοποιούνται τουλάχιστον αποστειρωμένα γάντια, σύριγγες και βελόνες, λαμβάνοντας υπόψη τις αποστειρωμένες χειρουργικές κουρτίνες. Η συλλογή ΕΝΥ γίνεται συνήθως σε πλάγια ανάκλιση, ανάκλιση στέρνου ή καθιστή θέση, βελτιώνοντας την πρόσβαση στις εγκεφαλικές κοιλίες ή διευρύνοντας τον μεσοσπονδύλιο χώρο μέσω κάμψης του αυχένα ή της σπονδυλικής στήλης. Το μέγεθος και το μήκος της επιλεγμένης βελόνας πρέπει να είναι κατάλληλα για το είδος και το μέγεθος των μη-ανθρώπινων πρωτευόντων. Οι τεχνικές, ο εξοπλισμός, τα αναλώσιμα που χρησιμοποιούνται κατά τη διάρκεια της διαδικασίας και η περιεγχειρητική φροντίδα ποικίλλουν ανάλογα με το είδος, τους ερευνητικούς στόχους και τις προτιμήσεις των κλινικών κτηνιάτρων.
Ορισμένα ερευνητικά πρωτόκολλα μπορεί να απαιτούν συνεχή συλλογή ΕΝΥ με την πάροδο του χρόνου ή συλλογή δειγμάτων ΕΝΥ από μη αναισθητοποιημένα άτομα. Για αυτά τα πρωτόκολλα, η συνεχής συλλογή ΕΝΥ από ξύπνιους πιθήκους rhesus μπορεί να επιτευχθεί μέσω μακροπρόθεσμων εμφυτευμένων καθετήρων ΕΝΥ που συνδέονται με υποδόριες θύρες συλλογής.
Ο συγγραφέας έχει καταβάλει κάθε δυνατή προσπάθεια να βρει τις πιο πρόσφατες αναφορές σχετικά με τον συνολικό όγκο ΕΝΥ, τα όρια ή τις συστάσεις για παρακεντήσεις σκληράς μήνιγγας, τη συχνότητα συλλογής, τον ασφαλή όγκο απόσυρσης και τα ποσοστά αναπλήρωσης ΕΝΥ. Η βιβλιογραφία σχετικά με αυτήν την πτυχή είναι περιορισμένη για τα περισσότερα πρωτεύοντα μη-ανθρώπινα. Επιπλέον, οι μέθοδοι συλλογής ποικίλλουν, καθώς έρευνες από μέλη της μη-Human Primate Veterinary Association δείχνουν ότι διάφορα ιδρύματα χρησιμοποιούν με επιτυχία διαφορετικές μεθόδους για τη συλλογή ΕΝΥ. Ως εκ τούτου, ο συγγραφέας παρέχει σκέψεις και συστάσεις για τη συλλογή ΕΝΥ με βάση τα υπάρχοντα καλύτερα στοιχεία.
Για αναφορά, προηγούμενες μελέτες έχουν καθορίσει ότι ο φαινομενικός όγκος του ΕΝΥ σε ενήλικες αρσενικούς πιθήκους rhesus (8,0-10,6 kg) είναι 10+/-0,06 mL, με ρυθμό ροής ΕΝΥ 0.018+/-0,003 mL/min. Ο ρυθμός σχηματισμού ΕΝΥ σε πιθήκους rhesus κυμαίνεται από 28,6-44,2 μL/min. Απαιτείται περαιτέρω έρευνα σε πρωτεύοντα πλην του ανθρώπου σε αυτόν τον τομέα για να διευκολυνθεί η ανάπτυξη πιο διδακτικών συστάσεων.
II. Πιθανές ανεπιθύμητες ενέργειες
Αν και οι επιπλοκές κατά τη συλλογή ΕΝΥ σε μη{0}}ανθρώπινα πρωτεύοντα είναι σπάνιες, οι ανατομικές παραλλαγές και οι ακατάλληλες ή ανεπαρκείς τεχνικές μέθοδοι μπορεί να οδηγήσουν σε βλάβη του δείγματος ή επιπλοκές όπως αιμορραγία, κήλη, μόλυνση, βλάβη στο εγκεφαλικό στέλεχος, στο νωτιαίο μυελό ή στις νευρικές ρίζες και δυσφορία στα ζώα. Αν και αυτές οι επιπλοκές είναι σπάνιες, μπορούν να θέσουν σε κίνδυνο την καλή διαβίωση των ζώων.
Λόγω των κινδύνων που εμπεριέχονται, το ΕΝΥ θα πρέπει να συλλέγεται από κτηνίατρο ή εκπαιδευμένο κτηνιατρικό προσωπικό. Για ανεπιτυχείς προσπάθειες συλλογής ΕΝΥ, οι πρακτικές ενδέχεται να διαφέρουν. Είναι κοινή πρακτική να επιτρέπονται έως και τρεις ανεπιτυχείς προσπάθειες από ένα άτομο. Μετά την τρίτη αποτυχημένη προσπάθεια, θα πρέπει να αναλάβει άλλο άτομο με τα κατάλληλα προσόντα. Εάν το δεύτερο άτομο δεν μπορεί να συλλέξει ΕΝΥ μετά από τρεις προσπάθειες, οι προσπάθειες θα πρέπει να σταματήσουν. Εν τω μεταξύ, το ζώο θα λάβει την κατάλληλη αναλγητική θεραπεία και θα αναρρώσει από την αναισθησία. Η αλλαγή του σημείου συλλογής (π.χ. από εγκεφαλικές κοιλίες σε οσφυϊκές κοιλίες) μετά από ανεπιτυχείς προσπάθειες οδηγεί συχνά σε επιτυχία. Εάν συμβεί μια αποτυχημένη προσπάθεια χωρίς καθοδήγηση απεικόνισης, μπορεί να χρησιμοποιηθεί η τοποθέτηση βελόνας με ακτινοσκόπηση-. Εκτός από την αύξηση του ποσοστού επιτυχίας, η καθοδήγηση εικόνας μπορεί επίσης να μειώσει το ποσοστό των τραυματικών παρακεντήσεων.
Η μετεγχειρητική παρακολούθηση θα πρέπει να συνεχιστεί έως ότου το ζώο επιστρέψει στο κλουβί του και μπορεί να διατηρήσει όρθια στάση χωρίς υποστήριξη. Η παρακολούθηση των ζώων θα πρέπει να διαρκεί τουλάχιστον 24 ώρες ή σύμφωνα με το πρωτόκολλο που έχει εγκριθεί από την Ιδρυματική Επιτροπή Φροντίδας και Χρήσης Ζώων (IACUC). Η παρακολούθηση θα πρέπει να περιλαμβάνει αξιολογήσεις βασικών φυσιολογικών, συμπεριφορικών και κινητικών παραμέτρων. Σημεία νευρολογικής δυσλειτουργίας, συμπεριλαμβανομένων ενδεικτικά του λήθαργου, της κατάθλιψης, του κώματος και των σημείων πίεσης της κεφαλής, θα πρέπει να αξιολογούνται ιδιαίτερα. Οι πονοκέφαλοι και η επακόλουθη ενδοκρανιακή υπόταση μετά από συλλογή ΕΝΥ δεν είναι ασυνήθιστες στην ιατρική. Λαμβάνοντας υπόψη αυτήν την πιθανή επιπλοκή σε μη-ανθρώπινα πρωτεύοντα, η αναλγητική θεραπεία θα πρέπει να παρέχεται κατά τη διάρκεια της χειρουργικής επέμβασης και να συνεχίζεται για 2-3 ημέρες μετεγχειρητικά ή όπως απαιτείται με βάση μετεγχειρητικές παρατηρήσεις που σχετίζονται με συμπεριφορές που σχετίζονται με πονοκέφαλο ή πόνο στη σπονδυλική στήλη. Το πιο αποτελεσματικό αναλγητικό σχήμα μπορεί να περιλαμβάνει ολοκληρωμένη θεραπεία που ξεκινά προεγχειρητικά.
III. Θεωρήσεις της IACUC και τήρηση αρχείων
Η IACUC θα πρέπει να είναι εξοικειωμένη με τις διαδικασίες που σχετίζονται με τη συλλογή ΕΝΥ και όλες τις πιθανές επιπλοκές και να τις επανεξετάζει τουλάχιστον ετησίως. Όλες οι σχετικές πληροφορίες, όπως δόσεις φαρμάκων, προεγχειρητικά σκευάσματα, όγκοι ΕΝΥ που συλλέγονται, συχνότητα συλλογής και βραχυπρόθεσμη και μακροπρόθεσμη μετεγχειρητική αποκατάσταση, θα πρέπει να περιγράφονται στο πρωτόκολλο IACUC και να τεκμηριώνονται κατάλληλα σε ιατρικά αρχεία ή εργαστηριακά αρχεία.
Ενώ το ΕΝΥ μπορεί να είναι κρίσιμα δεδομένα στα ερευνητικά πρωτόκολλα, οι ακατάλληλες τεχνικές συλλογής μπορούν να επηρεάσουν την καλή διαβίωση των ζώων. Κατά την υποβολή των πρωτοκόλλων, θα πρέπει να παρέχεται επιστημονική αιτιολόγηση για τον αριθμό και τη συχνότητα των συλλογών. Συγκεκριμένα, η IACUC θα πρέπει να αξιολογεί προσεκτικά κάθε πρόταση που περιλαμβάνει συλλογή ΕΝΥ και να εξετάζει τα ακόλουθα:
1.Είναι απαραίτητη η συλλογή ΕΝΥ για την επίτευξη των επιστημονικών στόχων που περιγράφονται στο πρωτόκολλο;
2.Υπάρχουν διαθέσιμες εναλλακτικές μέθοδοι και λιγότερο επεμβατικές μέθοδοι αξιολόγησης του κεντρικού νευρικού συστήματος (όπως τεχνικές απεικόνισης) και αν ναι, έχουν ληφθεί υπόψη;
3.Οι χειριστές έχουν λάβει την κατάλληλη εκπαίδευση και διαθέτουν επαρκείς δεξιότητες;
4.Θα παρέχονται κατάλληλα περιεγχειρητικά αναισθητικά και αναλγητικά σχήματα; Θα πρέπει να ζητείται διαβούλευση με κτηνιάτρους εργαστηριακών ζώων σχετικά με σχέδια αναισθησίας και αναλγητικών.
5. Ο όγκος του ΕΝΥ που συλλέγεται λαμβάνει υπόψη την ηλικία και το μέγεθος του ζώου;
6. Είναι ο αριθμός και η συχνότητα των παρακεντήσεων της σκληράς μήνιγγας κατάλληλες για το ζώο και έχει ελαχιστοποιηθεί ο κίνδυνος επιπλοκών; Εάν πολλές συλλογές ΕΝΥ αποτελούν μέρος της μελέτης, θα πρέπει να προσδιορίζονται οι μέγιστοι χρόνοι συλλογής για κάθε ζώο.
7.Είναι κατάλληλο το σχέδιο μετεγχειρητικής παρακολούθησης;
8. Έχουν ληφθεί υπόψη όλες οι πιθανές μετεγχειρητικές επιπλοκές και έχουν καταγραφεί όλες οι εύλογες παρεμβάσεις, συμπεριλαμβανομένης της ευθανασίας;
